Izdelki

Ta študija opisuje preprosto in učinkovito metodo, ki uporablja tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC), povezano s fluorescenčno detekcijo za določanje kinetičnih parametrov privzema glutamata v živčnem tkivu.Tkivo mrežnice, pridobljeno iz 7 dni starih piščancev, je bilo 10 minut inkubirano z znanimi koncentracijami glutamata (50-2000 μM) in izmerjene so bile ravni nevrotransmiterja, derivatiziranega z o-ftaldehidom (OPA), v inkubacijskem mediju.Z oceno razlike med začetno in končno koncentracijo glutamata v gojišču smo opredelili mehanizem nasičenega privzema (K(m)=8,2 in V(max)=9,8 nmol/mg proteina/min).Ta ukrep je bil v veliki meri odvisen od natrija in temperature, kar je močno podpiralo dejstvo, da je mehanizem za znižanje koncentracije dejansko prevzem s prenašalci z visoko afiniteto.Poleg tega so naši rezultati tudi pokazali, da je cinkov klorid (zaviralec transporterjev glutamata/aspartata) izzval od koncentracije odvisno zmanjšanje privzema glutama te, kar dokazuje specifičnost naše metodologije.Na splošno to delo opisuje alternativno metodologijo za oceno privzema glutamata v živčnem tkivu z uporabo HPLC.Ta pristop bi lahko bil pomembno orodje za študije, povezane s karakterizacijo minutnih sprememb v transportu glutamata, povezanih s poškodbo centralnega živčnega sistema.