Izdelki

LecA (PA-IL) je citotoksični lektin in adhezin, ki ga proizvaja Pseudomonas aeruginosa in veže hidrofobne galaktozide z visoko specifičnostjo in afiniteto.Z uporabo translacijske fuzije lecA-egfp in imunoblot analize zunajceličnega matriksa biofilma pokažemo, da se lecA izraža v celicah, gojenih na biofilmu.Pri statičnih testih biofilma tako na polistirenu kot na nerjavnem jeklu je bila globina in površinska pokritost biofilma zmanjšana z mutacijo lecA in povečana v sevu PAO-P47, ki prekomerno proizvaja LecA.Pokritost površine biofilma s starševskim sevom, PAO-P47, vendar ne z mutantom lecA na jeklenih kuponih, je prav tako zavirala rast v prisotnosti izopropil-beta-D-tiogalaktozida (IPTG) ali p-nitrofenil-alfa-D-galaktozida ( NPG).Poleg tega bi lahko zrele biofilme divjega tipa, ki nastanejo v odsotnosti teh hidrofobnih galaktozidov, razpršili z dodatkom IPTG.Nasprotno pa dodatek p-nitrofenil-alfa-L-fukoze (NPF), ki ima visoko afiniteto za lektin P. aeruginosa LecB (PA-IIL), ni vplival na tvorbo ali razpršitev biofilma.Prisotnost IPTG, NPG ali NPF ni vplivala na planktonsko rast P. aeruginosa PAO1, prav tako sev ni mogel uporabiti teh sladkorjev kot virov ogljika, kar kaže, da so opaženi učinki na tvorbo biofilma posledica kompetitivnega zaviranja LecA-liganda vezava.Podobni rezultati so bili pridobljeni tudi za biofilme, gojene v pogojih dinamičnega toka na jeklenih kuponih, kar kaže, da LecA prispeva k arhitekturi biofilma P. aeruginosa v različnih okoljskih pogojih.

V listih rastlin Arabidopsis so odkrili alfa-L-fukozidazo (EC 3.2.1.51), ki lahko sprosti t-fukozilni ostanek iz stranske verige ksiloglukanskih oligosaharidov.Poleg tega je bila alfa-L-fukozidaza s podobno specifičnostjo substrata očiščena iz listov zelja (Brassica oleracea), da se na SDS-PAGE prikaže en sam trak.Dve peptidni sekvenci sta bili pridobljeni iz tega proteinskega pasu in ju uporabili za identifikacijo gena Arabidopsis, ki kodira alfa-fukozidazo, za katero predlagamo, da jo imenujemo AtFXG1.Poleg tega je bil najden tudi gen Arabidopsis s homologijo z znanimi alfa-L-fukozidazami in predlagali smo, da ga poimenujemo kot AtFUC1.Tako AtFXG1 kot ATFUC1 sta bila heterologno izražena v celicah Pichia pastoris in aktivnosti alfa-L-fukozidaze, izločene v gojišče.Alfa-L-fukozidaza, ki jo kodira AtFXG1, je bila aktivna proti oligosaharidom iz ksiloglukana XXFG kot tudi proti 2'-fukozil-laktitolu, vendar ne proti p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozidu.Vendar je bil heterologno izražen AtFUC1 aktiven samo proti 2'-fukozil-laktitolu.Tako mora biti prvo povezano s presnovo ksiloglukana.