ONPG CAS:369-07-3 98,0 % najmanj bel do umazano bel prah
| Kataloška številka | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| ime izdelka | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galaktopiranozid) |
| Molekularna formula | C12H15NO8 |
| Molekularna teža | 301.25 |
| Podrobnosti o shranjevanju | 2 do 8 °C |
| Usklajena tarifna oznaka | 29400000 |
Specifikacije produkta
| Čistost (HPLC) | Min.98,0 % |
| Videz | Bel do umazano bel prah |
| rešitev(1% v vodi) | Bistra, brezbarvna do rahlo rumena raztopina |
| Vsebnost vode(Karl Fisher) | maks.0,5 % |
| Specifična optična rotacija [α]D20(c=1, H2O) | -65,0 °C do -73,0 °C |
Razprava o testu ONPG (test β-galaktozidaze)
V zadnjem času se pogosto pojavljajo vprašanja: 1. Zakaj se lahko test ONPG uporablja za razlikovanje zapoznele fermentacije laktoze?2. Zakaj nacionalni standard določa, da je treba za test ONPG uporabiti 3 % natrijev klorid trisaharid železa (ali trisaharid železa)?3. Zakaj bi morali za Vibrio parahaemolyticus pri izvajanju OPNG testa dodajati toluen po kapljicah po standardu?Kaj je funkcija?
Naše podjetje je pregledalo veliko informacij, jih povzelo in delilo z vami spodaj:
Princip: Kitajsko ime ONPG je o-nitrobenzen-β-D-galaktopiranozid.ONPG se lahko hidrolizira v galaktozo in rumeni o-nitrofenol (ONP) z β-galaktozidazo, tako da je aktivnost β-galaktozidaze mogoče zaznati s spremembo barve gojišča kulture.
Laktoza je sladkor, ki ga večina mikroorganizmov mora zaznati.Njegova presnova zahteva dva encima, eden je celična permeaza, laktoza vstopi v celice pod delovanjem permeaze;druga je β-galaktozidaza, ki hidrolizira laktozo v galaktozo.Laktoza in glukoza.β-galaktozidaza lahko tudi neposredno deluje na ONPG in ga hidrolizira v galaktozo in rumeni o-nitrofenol (ONP).To je mogoče storiti v 24 urah, tudi z laktoznimi zakasnjenimi fermentorji.Zato pojasnjuje rezultate opazovanja pobiranja kulture 1 s poševnega agarja in njenega inokuliranja v polnem krogu pri 36 °C za 1–3 ure in 24 ur.Če se proizvaja β-galaktozidaza, bo porumenila v 1-3h, če tega encima ni, pa ne bo spremenila barve v 24h.
Glede na zgornja dva encima lahko mikroorganizme razdelimo v naslednje kategorije:
1 bakterije, ki fermentirajo laktozo (18-24 ur) s permeazo in β-galaktozidazo P + G +;
2 Zakasnjeni fermentorji laktoze (trajajo več kot 24 ur) brez permeaze, vendar imajo galaktozidazo: P- G+.
3 Nelaktozni fermentorji brez permeaze in galaktozidaze: P- G-.
Test ONPG se lahko uporablja za razlikovanje bakterij, ki zaostajajo za fermentacijo laktoze (P-G+), od bakterij, ki ne fermentirajo laktoze (PG-), kot so:
1 Razlikujte pozne fermentorje laktoze (P-G+) od fermentorjev brez laktoze (P-G-).
(a) Citrobacter (+) in Salmonella arizonae (+) iz Salmonelle (-).
(b) Escherichia coli (+) iz Shigella sonnei (-).
Zakaj je bil test ONPG izveden z uporabo nočne kulture na 3 % natrijevega klorida, železovega trisaharida (železov trisaharid)?Naše podjetje je pridobilo veliko informacij, vendar ni nobene jasne izjave.Samo na spletni strani FDA je zapisano, da "kulture, ki jih je treba testirati, inokulirajte na poševne nastavke agarja s trojnim sladkorjem in železom in inkubirajte 18 ur pri 37 °C (ali drugi ustrezni temperaturi, če je potrebno). Poševne nastavke s hranilnim (ali drugim) agarjem, ki vsebujejo 1,0 Lahko se uporabi tudi % laktoze."pomeni: testne bakterije smo nacepili na gojišče trisaharidnega železa in gojili pri 37 °C 18 ur.Sprejemljivo je tudi poševno (ali drugo) gojišče s hranilnim agarjem, ki vsebuje 1 % laktoze.Zato se sklepa, da medij trisaharidnega železa vsebuje laktozo.Po rasti čez noč so bakterije proizvedle dobro aktivno β-galaktozidazo.Z uporabo takih bakterij lahko ONPG hitreje razgradi β-galaktozidaza.Eksperimentalni pojav se hitreje in bolje manifestira.Dodatek po kapljicah toluena in 5-minutna vodna kopel sta za popolno sprostitev β-galaktozidaze.
