Izdelki

Pred tem smo vzpostavili dolgotrajno, 3-dimenzionalno kulturo organoidov iz mišjih tkiv (črevesje, želodec, trebušna slinavka in jetra) ter človeškega črevesja in trebušne slinavke.Tukaj opisujemo pogoje, potrebne za dolgoročno 3-dimenzionalno kulturo človeških želodčnih matičnih celic.Tehnologijo je mogoče uporabiti za preučevanje odziva epitelija na okužbo s Helicobacter pylori. Generirali smo organoide iz kirurških vzorcev človeškega želodčnega trupa.Pogoji gojenja so bili razviti na podlagi tistih za mišji želodčni in človeški črevesni sistem.Za okužbo organoidov s H pylori smo uporabili mikroinjekcije.Epitelijske odzive smo izmerili z uporabo mikromrež in kvantitativne analize verižne reakcije s polimerazo. Človeške želodčne celice smo razširili za nedoločen čas v 3-dimenzionalnih kulturah.Gojili smo celice iz zdravih želodčnih tkiv, posamezno razvrščenih izvornih celic ali tumorskih tkiv.Organoidi so ohranili številne značilnosti svojih tkiv na podlagi njihove histologije, izražanja markerjev in evploidije.Organoidi iz zdravega tkiva izražajo označevalce 4 linij želodca in se samoorganizirajo v domene žleze in jamice.Lahko bi jih usmerili v specifično izražanje bodisi linij želodčne žleze ali želodčne jame z dodatkom nikotinamida in odvzemom WNT.Čeprav so imele linije želodčne jamice le obrobne reakcije na bakterijsko okužbo, so linije želodčne žleze povzročile močan vnetni odziv. Razvili smo sistem za gojenje človeških želodčnih organoidov.Ta sistem se lahko uporablja za preučevanje okužbe s H pylori in drugih želodčnih patologij. Avtorske pravice © 2015 AGA Institute.Založnik Elsevier Inc. Vse pravice pridržane.