Izdelki

Aktivatorji karboanhidraze: prva študija aktivacije človeške sekretorne izoforme VI z aminokislinami in amini.

Sekretorni izoencim človeške karboanhidraze (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, je bil kloniran, izražen in prečiščen v bakterijskem ekspresijskem sistemu.Kinetični parametri za reakcijo hidratacije CO(2) so dokazali, da ima hCA VI ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) in k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (pri pH 7,5 in 20 stopinjah C).hCA VI ima pomembno katalitično aktivnost za fiziološko reakcijo, enakega reda velikosti kot vseprisotna izoforma CA I ali transmembranski, s tumorjem povezan izoencim CA IX.Pokazalo se je, da vrsta aminokislin in aminov deluje kot aktivatorji CA VI s spremenljivo učinkovitostjo.l-His, l-Trp in dopamin so pokazali šibke učinke aktivacije CA VI (K(A)s v območju 21-42 mikroM), medtem ko so d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonin in nekateri piridil-alkilamini so bili boljši aktivatorji, s K(A)s v območju 13-19 mikroM.Najboljši aktivatorji CA VI so bili l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe in histamin, s K(A)s v območju 1,23-9,31 mikroM.Vsi ti aktivatorji povečajo k(cat), ne da bi vplivali na K(M), in tako sodelujejo v stopnji določanja hitrosti v katalitskem ciklu, reakcijah prenosa protonov med aktivnim mestom encima in okoljem.