Izdelki

Eden od dejavnikov, ki preprečuje klinično uporabo regenerativne medicine pri degenerativnih boleznih hrustanca, je primeren vir celic.Hondrociti, edina celična vrsta hrustanca, gojena in vitro v pogojih kulture za povečanje števila celic, izgubijo svoj fenotip skupaj s sposobnostjo ustvarjanja hialinskega hrustančnega tkiva.V tej študiji ugotavljamo, da tridimenzionalni (3D) sistem kulture brez seruma in rastnega faktorja obnovi sposobnost pasiranih hondrocitov, da tvorijo hrustančno tkivo in vitro, proces, ki vključuje sox9. Goveji artikularni hondrociti so bili dvakrat pasirani v omogočajo povečanje števila celic (P2) in gojijo pri visoki gostoti na 3D membranah, prevlečenih s kolagenom tipa II, v medijih z visoko vsebnostjo glukoze, dopolnjenih z insulinom in deksametazonom (SF3D).Celice smo okarakterizirali po enoslojni ekspanziji in po 3D kulturi s pretočno citometrijo, izražanjem genov in histologijo.Opredeljene so bile zgodnje spremembe v poteh signalne transdukcije med rediferenciacijo. Celice P2 so pokazale profil antigenov, podoben prednikom, 99 % CD44(+) in 40 % CD105(+) ter profil genske ekspresije, ki nakazuje interzonske celice.P2 v SF3D izraža hondrogene gene in nakopičen zunajcelični matriks.Znižanje insulinskega receptorja (IR) s HNMPA-(AM3) ali poti kinaze PI-3/AKT (aktivirane z zdravljenjem z insulinom) z Wortmaninom je zaviralo sintezo kolagena.HNMPA-(AM3) je zmanjšal izražanje genov Col2, Col11 in IR ter Sox6 in -9.Analize koimunoprecipitacije in kromatinske imunoprecipitacije celic, obdelanih s HNMPA-(AM3), so pokazale vezavo koaktivatorjev Sox6 in Med12 na Sox9, vendar zmanjšano vezavo Sox9-Col2a1. Opisujemo novo metodo kulture, ki omogoča povečanje števila hondrocitov in spodbuja nastanek hialinu podobnega hrustančnega tkiva, deloma z inzulinom posredovano vezavo Sox9-Col2a1.Primernost tkiva, ustvarjenega s tem pristopom, za uporabo pri popravljanju sklepov je treba preučiti in vivo.