Izdelki

Brucele so etiološki povzročitelji bruceloze, po vsem svetu razširjene zoonoze.Te bakterije so fakultativni znotrajcelični paraziti in so zato sposobne prilagoditi svoj metabolizem zunajceličnim in znotrajceličnim okoljem, s katerimi se srečujejo med infekcijskim ciklom.Vendar je ta vidik biologije Brucelle nepopolno razumljen in hranila, ki so na voljo v znotrajcelični niši, niso znana.Tu smo raziskali osrednje poti metabolizma C, ki ga uporablja Brucella abortus, tako da smo odstranili domnevno fruktozo-1,6-bisfosfatazo (fbp in glpX), fosfoenolpiruvat karboksikinazo (pckA), piruvat fosfat dikinazo (ppdK) in jabolčni encim (mae) geni.V glukoneogenem, vendar ne v bogatem mediju, je bila rast mutantov ΔppdK in Δmae močno oslabljena, rast dvojnega mutanta Δfbp-ΔglpX pa zmanjšana.V makrofagih sta samo mutanta ΔppdK in Δmae pokazala zmanjšano razmnoževanje, študije z mutantom ΔppdK pa so potrdile, da je dosegel replikativno nišo.Podobno sta bila pri miših oslabljena samo mutanta ΔppdK in Δmae, pri čemer je bil prvi očiščen do 10. tedna, drugi pa je vztrajal dlje kot 12 tednov.Raziskali smo tudi glioksilatni cikel.Čeprav je bila aktivnost promotorja aceA (izocitratne liaze) povečana v bogatem mediju, motnja aceA ni imela učinka in vitro ali na razmnoževanje v makrofagih ali mišji vranici.Rezultati kažejo, da B. abortus raste intracelularno z uporabo omejene zaloge 6-C (in 5-C) sladkorjev, ki se kompenzira z glutamatom in morda drugimi aminokislinami, ki vstopajo v Krebsov cikel brez kritične vloge glioksilatnega šanta.