Izdelki

Prej smo naleteli na regulacijske procese, pri katerih je dihidrotestosteron (DHT) izvajal svoj zaviralni učinek na gensko represijo proteina, povezanega s paratiroidnim hormonom (PTHrP), preko estrogenskega receptorja (ER)α, ne pa androgenega receptorja (AR), v celicah raka dojke MCF-7 .Tu smo raziskali, ali je takšna nenormalna interakcija ligand-jedrski receptor (NR) prisotna v celicah LNCaP raka prostate.Najprej smo potrdili, da celice LNCaP izražajo velike količine AR pri zanemarljivih ravneh ERα/β ali progesteronskega receptorja.Po neodvisnem dajanju 17β-estradiola (E2), DHT ali R5020 so opazili tako supresijo PTHrP kot aktivacijo genov antigena, specifičnega za prostato.V skladu z idejo, da je LNCaP AR izgubil svojo specifičnost liganda zaradi mutacije (Thr-Ala877), so poskusi s siRNA, ki ciljajo na zadevni NR, pokazali, da je AR monopoliziral vlogo mediatorja skupne hormonsko odvisne regulacije, ki je bila vedno povezana z z jedrsko translokacijo tega mutiranega AR.Analiza mikromrež genske regulacije z DHT, E2 ali R5020 je razkrila, da se več kot polovica genov nižje od AR (Thr-Ala877) prekriva v celicah LNCaP.Posebej zanimivo je, da smo ugotovili, da sta AR (divji tip [wt]) in AR (Thr-Ala877) enako odgovorna za interakcije E2-AR.Poskusi s fluorescenčno mikroskopijo so pokazali, da sta bila tako EGFP-AR (wt) kot EGFP-AR (Thr-Ala877) izključno lokalizirana v jedru po zdravljenju z E2 ali DHT.Poleg tega so reporterski testi razkrili, da so nekatere druge rakave celice pokazale aberantno signalizacijo E2-AR (wt), podobno kot v celicah LNCaP.Tu domnevamo prisotnost zapletenih interakcij med wt AR in E2 v nekaterih hormonsko občutljivih rakavih celicah.