X-GAL CAS:7240-90-6 98 % bel do umazano bel kristalinični prah
| Kataloška številka | XD90008 |
| ime izdelka | X-Gal (5-bromo-4-kloro-3-indolil-beta-D-galaktopiranozid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekularna formula | C14H15BrClNO6 |
| Molekularna teža | 408.63 |
| Podrobnosti o shranjevanju | -2 do -6 °C |
| Usklajena tarifna oznaka | 29400000 |
Specifikacije produkta
| Videz raztopine | Bistra, brezbarvna do svetlo rumena raztopina (50 mg/ml v DMF:MeOH, 1:1) |
| Specifična optična rotacija | -61,5 +/- 1 |
| Videz | Bel do umazano bel kristaliničen prah |
| Čistost HPLC | najmanj 99 % |
| Topnost (5 % v DMF) | Topno (5 % w/v, DMF) |
| Voda KF | največ 1 % |
| Test (HPLC na brezvodni osnovi) | najmanj 98 % m/m |
Uporaba X-gal
X-gal (tudi skrajšano BCIG za 5-bromo-4-kloro-3-indolil-β-D-galaktopiranozid) je organska spojina, sestavljena iz galaktoze, povezane s substituiranim indolom.Spojino je leta 1964 sintetiziral Jerome Horwitz s sodelavci. Uradno kemijsko ime je pogosto skrajšano na manj natančne, a tudi manj okorne fraze, kot je bromokloroindoksil galaktozid.X iz indoksil je lahko vir X v kontrakciji X-gal.X-gal se pogosto uporablja v molekularni biologiji za testiranje prisotnosti encima, β-galaktozidaze, namesto njegove običajne tarče, β-galaktozida.Uporablja se tudi za odkrivanje aktivnosti tega encima v histokemiji in bakteriologiji.X-gal je eden izmed mnogih indoksilnih glikozidov in estrov, ki kot rezultat encimsko katalizirane hidrolize dajejo netopne modre spojine, podobne indigovemu barvilu.
X-gal je analog laktoze, zato ga lahko hidrolizira encim β-galaktozidaza, ki cepi β-glikozidno vez v D-laktozi.X-gal, ko ga cepi β-galaktozidaza, daje galaktozo in 5-bromo-4-kloro-3-hidroksiindol - 1. Slednji nato spontano dimerizira in oksidira v 5,5'-dibromo-4,4'-dikloro -indigo - 2, produkt intenzivno modre barve, ki je netopen.X-gal sam je brezbarven, zato se lahko prisotnost modro obarvanega produkta uporabi kot test za prisotnost aktivne β-galaktozidaze.To tudi omogoča, da se bakterijska β-galaktozidaza (tako imenovana lacZ) uporablja kot poročevalec v različnih aplikacijah.
V dvohibridni analizi se lahko β-galaktozidaza uporabi kot poročevalec za identifikacijo proteinov, ki medsebojno delujejo.Pri tej metodi lahko knjižnice genomov pregledamo glede interakcije beljakovin z uporabo kvasovk ali bakterijskega sistema.Kjer pride do uspešne interakcije med pregledanimi proteini, bo to povzročilo vezavo aktivacijske domene na promotor.Če je promotor povezan z genom lacZ, bo proizvodnja β-galaktozidaze, ki ima za posledico tvorbo modro pigmentiranih kolonij v prisotnosti X-gal, torej kazala na uspešno interakcijo med proteini.Ta tehnika je lahko omejena na presejalne knjižnice velikosti manj kot okoli 106. Uspešna cepitev X-gal povzroči tudi opazen neprijeten vonj zaradi izhlapevanja indola.
Ker je sam X-gal brezbarven, se lahko prisotnost modro obarvanega produkta uporabi kot test za prisotnost aktivne β-galaktozidaze.
Ta enostavna identifikacija aktivnega encima omogoča, da se gen za βgalaktozidazo (gen lacZ) uporablja kot reporterski gen v različnih aplikacijah.
