Izdelki

PIPES [piperazin-N,N′-bis(2-etansulfonska kislina)] se pogosto uporablja kot pufrsko sredstvo v biokemiji.To je pufer etansulfonske kisline, ki so ga razvili Good et al.leta 1960.PIPES ima pKa blizu fiziološkega pH, zaradi česar je uporaben pri delu s celičnimi kulturami.Dokumentirano je, da zmanjša izgubo lipidov pri pufriranju histologije glutaraldehida v rastlinskih in živalskih tkivih. Pufrsko sredstvo s pKa blizu fiziološkega pH.

Protimikrobni peptid magainin 2 tvori pore v lipidnih membranah in inducira membransko prepustnost celične vsebine.Čeprav je ta permeacija verjetno glavni vzrok njegove baktericidne aktivnosti, ostaja mehanizem nastajanja por slabo razumljen.Zato smo podrobno raziskali interakcijo magainina 2 z lipidnimi membranami z uporabo enojnih velikanskih unilamelarnih veziklov (GUV).Vezava magainina 2 na lipidno membrano GUV-jev je povečala delno spremembo površine membrane, δ, ki je bila sorazmerna s površinsko koncentracijo magainina 2, X. To kaže, da je konstanta hitrosti z magaininom 2 induciranih dveh -prehod stanja iz nedotaknjenega stanja v stanje por se je močno povečal s povečanjem δ.Napetost lipidne membrane po aspiraciji GUV je prav tako aktivirala tvorbo por, ki jo povzroča magainin 2.Da bi razkrili lokacijo magainina 2, smo s konfokalno mikroskopijo raziskali interakcijo s karboksifluoresceinom (CF) označenega magainina 2 (CF-magainin 2) z enojnimi GUV, ki vsebujejo vodotopno fluorescentno sondo AF647.V odsotnosti napetosti zaradi aspiracije se je po interakciji magainina 2 intenzivnost fluorescence roba GUV zaradi CF-magainina 2 hitro povečala na enakomerno vrednost, ki je ostala konstantna dolgo časa in pri 4-32 s pred na začetku puščanja AF647 se je intenzivnost roba začela hitro povečevati na drugo enakomerno vrednost.Nasprotno pa v prisotnosti napetosti ni bilo opaziti povečanja intenzivnosti roba tik pred začetkom puščanja.Ti rezultati kažejo, da se magainin 2 ne more premakniti iz zunanje v notranjo monoplast do tik pred nastankom por.Na podlagi teh rezultatov sklepamo, da je pora, povzročena z magaininom 2, pora, aktivirana z raztezanjem, in da je raztezanje notranjega monosloja glavna gonilna sila tvorbe por.