Izdelki

Razvili smo nov sistem za dostavo majhne moteče RNA (siRNA) z uporabo ternarnega kompleksa s polietileniminom (PEI) in γ-poliglutaminsko kislino (γ-PGA), ki je pokazal učinek utišanja in brez citotoksičnosti.Binarni kompleksi siRNA s PEI so bili približno 73-102 nm v velikosti delcev in 45-52 mV v ζ-potencialu.Učinek utišanja kompleksov siRNA/PEI se je povečal s povečanjem PEI, kompleksi siRNA/PEI z razmerjem nabojev, večjim od 16, pa so pokazali znatno zmanjšanje luciferaze v celični liniji mišjega karcinoma kolona, ​​ki redno izraža luciferazo (celice Colon26/Luc).Vendar pa so opazili močno citotoksičnost in aglutinacijo krvi v kompleksu siRNA/Lipofectamine in kompleksu siRNA/PEI16.Poročali so, da je polnjenje kationskih kompleksov z anionsko spojino obetavna metoda za premagovanje teh toksičnosti.Zato smo pripravili ternarne komplekse siRNA s PEI (razmerje nabojev 16) z dodatkom γ-PGA za zmanjšanje citotoksičnosti in dostavo siRNA.Kot je bilo pričakovano, se je citotoksičnost ternarnih kompleksov zmanjšala s povečanjem vsebnosti γ-PGA, kar je zmanjšalo ζ-potencial kompleksov.V ternarnih kompleksih, vključno z γ-PGA z anionskim površinskim nabojem, so odkrili močan učinek utišanja, primerljiv s kompleksom siRNA/Lipofectamine.Visoka vključitev ternarnih kompleksov v celice Colon26/Luc je bila potrjena s fluorescenčno mikrokopijo.Ko smo dosegli knockdown eksogeno transfektiranega gena, smo v celicah B16-F10 ocenili sposobnost kompleksa, da posreduje knockdown endogenega gospodinjskega gena, gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH).Ternarni kompleks (kompleks siRNA/PEI16/γ-PGA12) je pokazal pomemben izločitveni učinek GAPDH.Tako smo razvili uporaben sistem dostave siRNA.