Izdelki

Vaskularna hiperpermeabilnost prispeva k obolevnosti pri vnetju.Sedanje metodologije za oceno prepustnosti in vivo na podlagi ekstravazacije albumina, vezanega na Evans Blue (EB), so okorne in pogosto premalo občutljive.Razvili smo novo metodologijo infrardeče fluorescence (IRF) za merjenje ekstravazacije EB-albumina za kvantificiranje vaskularne permeabilnosti v mišjih modelih.Žilno prepustnost, povzročeno z endotoksemijo, so pregledali za vse trdne organe, možgane, kožo in peritonej z IRF in tradicionalnim merjenjem EB v tkivnih izvlečkih na osnovi absorbance.IRF organa se je povečeval linearno z naraščajočimi koncentracijami intravenskega EB (2,5–25 mg/kg).Tkivni IRF je bil bolj občutljiv za kopičenje EB v primerjavi z metodo, ki temelji na absorbanci.V skladu s tem so bile razlike v vaskularni prepustnosti in kopičenju EB med mišmi, zdravljenimi z lipopolisaharidom, in mišmi, zdravljenimi s fiziološko raztopino, pogosto pomembne, če so bile analizirane z detekcijo na podlagi IRF, ne pa z detekcijo na osnovi absorbance.EB je bil odkrit v vseh 353 organih, analiziranih z IRF, vendar le v 67 % (239/353) organov, analiziranih z metodologijo, ki temelji na absorbanci, kar dokazuje izboljšano občutljivost zaznavanja EB v organih z IRF.Nasprotno pa je bil EB v plazmi po dajanju EB zlahka izmerjen z obema metodama z visoko korelacijo med obema metodama (n=116, r2=0,86).Kvantifikacija organsko specifičnih razlik EB-IRF zaradi endotoksina je bila optimalna, ko so IRF primerjali med mišmi, ki so se ujemale glede na težo, spol in starost, ter z ustreznimi popravki za težo organa in koncentracije EB v plazmi.Predvsem metodologija EB-IRF pusti organe nedotaknjene za kasnejšo histopatologijo.Če povzamemo, EB-IRF je nova, zelo občutljiva, hitra in priročna metoda za relativno kvantifikacijo EB v intaktnih organih zdravljenih v primerjavi s kontrolnimi mišmi.