Izdelki

1. S kinetiko inhibicije in računalniško simulacijo smo proučevali zaviralne učinke izorhamnetina na gobjo tirozinazo.Izorhamnetin je reverzibilno zaviral tirozinazo na mešan način pri Ki = 0,235 ± 0,013 mM.Meritve intrinzične fluorescence in fluorescence, ki veže 1-anilinonaftalen-8-sulfonat (ANS), so pokazale, da izorhamnetin ni povzročil pomembnih sprememb v terciarni strukturi tirozinaze.Da bi dobili vpogled v proces inaktivacije, smo kinetiko izračunali z meritvami časovnih intervalov in neprekinjenimi reakcijami substrata.Rezultati so pokazali, da je bila inaktivacija, inducirana z izorhamnetinom, reakcija prvega reda z dvofaznimi procesi.Da bi pridobili nadaljnji vpogled, smo simulirali povezavo med tirozinazo in izorhamnetinom.Simulacija je bila uspešna (vezne energije za Dock6.3: -32,58 kcal/mol, za AutoDock4.2: -5,66 kcal/mol in za Fred2.2: -48,86 kcal/mol), kar nakazuje, da izorhamnetin medsebojno deluje z več ostanki, npr. kot HIS244 in MET280.Ta strategija napovedovanja interakcij tirozinaze v kombinaciji s kinetiko, ki temelji na spojini flavanon, se lahko izkaže za koristno pri presejanju morebitnih naravnih zaviralcev tirozinaze.

2. Pot odvijanja kisline konalbumina (CA), monomernega glikoproteina iz kokošjega jajčnega beljaka, je bila raziskana z uporabo CD spektroskopije na daleč in blizu UV, intrinzične fluorescenčne emisije, ekstrinzične fluorescenčne sonde 1-anilino-8-naftalen sulfonata (ANS) in dinamično sipanje svetlobe (DLS).Opazujemo od pH odvisne spremembe v sekundarni in terciarni strukturi CA.Ima nativno podobno α-vijačno sekundarno strukturo pri pH 4,0, vendar izgubljeno strukturo pri pH 3,0.CA je obstajal izključno kot stanje pred staljene globule in stanje staljene globule v raztopini pri pH 4,0 oziroma pH 3,0.Vpliv pH na konformacijo in termostabilnost CA kaže na njegovo toplotno odpornost pri nevtralnem pH.Rezultati DLS kažejo, da je stanje MG obstajalo kot kompaktna oblika v vodnih raztopinah s hidrodinamičnim polmerom 4,7 nm.Dušenje fluorescence triptofana z akrilamidom je dodatno potrdilo kopičenje vmesnega stanja, delno razgrnjenega, med naravnim in nezvitim stanjem.