Izdelki

Učinki detergentov na aktivnost atpaze P-glikoproteina: razlike v motnjah bazalnih in od verapamila odvisnih aktivnosti.

P-glikoprotein (P-gp), glikoprotein plazemske membrane, povezan s fenotipom odpornosti na več zdravil, je odgovoren za od ATP odvisen iztok različnih amfifilnih zdravil.Z uporabo membranskih veziklov, pripravljenih iz celične linije DC-3F/ADX, odporne na več zdravil, smo proučevali motnje bazalne (tj. v odsotnosti zdravila) in od verapamila odvisne aktivnosti P-gp ATPaze, ki so jo sprožili različni detergenti, pri nesolubilizaciji, kot tudi pri solubilizirajočih koncentracijah.Postopno raztapljanje membrane z naraščajočo koncentracijo detergenta smo spremljali s poskusi sipanja svetlobe in centrifugiranja.Pri netopnih koncentracijah detergentov so vsi testirani detergenti razen DOC povzročili delno inhibicijo aktivnosti P-gp ATPaze, ki ni bila v korelaciji s količino različnih testiranih detergentov, vključenih v membrane.Analiza z verapamilom inducirane aktivacije P-gp razkriva, da aktivnost P-gp ATPaze različno modulirajo različni detergenti pri netopnih koncentracijah.Tako je večja verjetnost, da bo prišlo do specifičnih interakcij med P-gp in detergenti kot do globalne motnje membrane.Po solubilizaciji z različnimi testiranimi detergenti je bila bazalna aktivnost P-gp ATPaze skoraj popolnoma zavrta, razen v prisotnosti CHAPS, ki je lahko ohranil to aktivnost na ravni, primerljivi s tisto, izmerjeno v nativnih membranah.Vendar se je z verapamilom inducirana aktivacija P-gp ATPaze izgubila med solubilizacijo P-gp s CHAPS, vendar se je obnovila po razredčitvi CHAPS pod kritično micelarno koncentracijo.Ta opažanja kažejo na specifične interakcije med molekulami P-gp in CHAPS znotraj mešanih micel.Na splošno so naši podatki, ki dokazujejo specifične interakcije P-gp/detergenti, skladni z lokacijo transportnih mest zdravil na transmembranskih domenah P-gp.